ຊຸດ DNA ພັນທຸ ກຳ ຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ TGuide

A-1 ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງເຊລຫຼືເຊື້ອໄວຣັສຕໍ່າຢູ່ໃນຕົວຢ່າງເລີ່ມຕົ້ນ-ສ້າງຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຂອງເຊລຫຼືໄວຣັດ.

A-2 ຕົວຢ່າງການວິເຄາະບໍ່ພຽງພໍ-ຕົວຢ່າງບໍ່ໄດ້ຖືກປະສົມເຂົ້າກັນຢ່າງລະອຽດກັບສານກັນບູດ lysis. ມັນໄດ້ຖືກແນະ ນຳ ໃຫ້ປະສົມຢ່າງລະອຽດໂດຍການ ກຳ ມະຈອນເຕັ້ນເປັນເວລາ 1-2 ເທື່ອ. - ການກວດເຊລເຊລທີ່ບໍ່ພຽງພໍເກີດຈາກການຫຼຸດລົງຂອງໂປຣຕິນໃນ K. - ການຂາດເຊລຂອງເຊລຫຼືການເຊື່ອມໂຊມຂອງໂປຣຕີນເນື່ອງຈາກເວລາອາບນໍ້າອຸ່ນບໍ່ພຽງພໍ. ມັນໄດ້ຖືກແນະ ນຳ ໃຫ້ຕັດເນື້ອເຍື່ອເປັນຕ່ອນນ້ອຍ and ແລະຂະຫຍາຍເວລາອາບນ້ ຳ ເພື່ອ ກຳ ຈັດສິ່ງເສດເຫຼືອທັງinົດໃນ lysate.

A-3 ການດູດຊຶມ DNA ບໍ່ພຽງພໍ. -ບໍ່ມີການຕື່ມເອທານອນຫຼືເປີເຊັນຕໍ່າແທນເອທານອນ 100% ກ່ອນທີ່ນໍ້າຊ້າງຈະຖືກຍົກຍ້າຍເຂົ້າໄປໃນຖັນspinຸນ.

A-4 ຄ່າ pH ຂອງການປ້ອງກັນຕົວກໍານົດຕົວຕໍ່າເກີນໄປ. -ປັບ pH ໃຫ້ຢູ່ໃນລະຫວ່າງ 8.0-8.3.

ເອທານອນທີ່ຕົກຄ້າງຢູ່ໃນສານສະກັດ.

- ມີເຄື່ອງຊັກຜ້າ PW ທີ່ຍັງເຫຼືອຢູ່ໃນເຄື່ອງຊັກຜ້າ. ເອທານອນສາມາດຖອດອອກໄດ້ໂດຍການເຮັດໃຫ້ແກນກາງspinຸນເປັນເວລາ 3-5 ນາທີ, ແລະຈາກນັ້ນວາງໄວ້ທີ່ອຸນຫະພູມຫ້ອງຫຼືຕູ້ອົບ 50 ℃ປະມານ 1-2 ນາທີ.

A-1 ຕົວຢ່າງແມ່ນບໍ່ສົດ. - ສະກັດເອົາຕົວຢ່າງ DNA ເປັນຕົວຄວບຄຸມເພື່ອກວດສອບວ່າ DNA ໃນຕົວຢ່າງໄດ້ເຊື່ອມໂຊມລົງຫຼືບໍ່.

A-2 ການປິ່ນປົວລ່ວງ ໜ້າ ທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ. - ສາເຫດມາຈາກການປົນໄນໂຕຣເຈນແຫຼວຫຼາຍເກີນໄປ, ການໄດ້ຄວາມຊຸ່ມຄືນ, ຫຼືຈໍານວນຕົວຢ່າງທີ່ໃຫຍ່ເກີນໄປ.

ການປິ່ນປົວເບື້ອງຕົ້ນຄວນຈະແຕກຕ່າງກັນໄປສໍາລັບຕົວຢ່າງທີ່ແຕກຕ່າງກັນ. ສຳ ລັບຕົວຢ່າງຂອງຕົ້ນໄມ້, ໃຫ້ແນ່ໃຈວ່າໄດ້ບົດຢ່າງລະອຽດໃນໄນໂຕຣເຈນແຫຼວ. ສຳ ລັບຕົວຢ່າງສັດ, ເຮັດໃຫ້ເປັນເນື້ອດຽວກັນຫຼືບົດໃຫ້ລະອຽດໃນໄນໂຕຣເຈນແຫຼວ. ສໍາລັບຕົວຢ່າງທີ່ມີwallsາຫ້ອງເຊວທີ່ຍາກທີ່ຈະທໍາລາຍໄດ້ເຊັ່ນ: ເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ G+ ແລະເຊື້ອລາແມ່ນແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ວິທີ lysozyme, lyticase ຫຼືວິທີກົນຈັກເພື່ອທໍາລາຍwallsາຫ້ອງ.

4992201/4992202 ຊຸດພັນທຸ ກຳ DNA ຂອງພືດໄດ້ຮັບຮອງເອົາວິທີການອີງໃສ່ຖັນທີ່ຕ້ອງການ chloroform ເພື່ອສະກັດເອົາ. ມັນເespeciallyາະສົມໂດຍສະເພາະກັບຕົວຢ່າງພືດຊະນິດຕ່າງ,, ເຊັ່ນດຽວກັບdryຸ່ນພືດແຫ້ງ. Hi-DNAsecure Plant Kit ແມ່ນອີງໃສ່ຖັນ, ແຕ່ບໍ່ມີຄວາມຕ້ອງການການສະກັດເອົາສານ phenol/chloroform, ເຮັດໃຫ້ມັນປອດໄພແລະບໍ່ເປັນພິດ. ມັນເsuitableາະສົມ ສຳ ລັບພືດທີ່ມີສານໂພລີແຊກຄາໄຣສູງແລະມີເນື້ອໃນໂພລີຟີນອນຫຼາຍ. 4992709/4992710 ລະບົບພືດ DNAquick ຮັບຮອງເອົາວິທີການທີ່ເປັນຂອງແຫຼວ. ການສະກັດເອົາສານ Phenol/chloroform ແມ່ນບໍ່ຕ້ອງການເຊັ່ນກັນ. ຂັ້ນຕອນການກັ່ນຕອງແມ່ນງ່າຍດາຍແລະໄວໂດຍບໍ່ ຈຳ ກັດ ຈຳ ນວນເລີ່ມຕົ້ນຕົວຢ່າງ, ສະນັ້ນຜູ້ໃຊ້ສາມາດປັບປ່ຽນປະລິມານໄດ້ຢ່າງຄ່ອງແຄ້ວຕາມຄວາມຕ້ອງການຂອງການທົດລອງ. ຂະ ໜາດ ໃຫຍ່ຂອງຊິ້ນສ່ວນ gDNA ສາມາດຫາໄດ້ດ້ວຍຜົນຜະລິດສູງ.

DNA ພັນທຸ ກຳ ໄດ້ຖືກສະກັດມາຈາກປະລິມານຕົວຢ່າງເລືອດທັງhumanົດຂອງມະນຸດໂດຍຊຸດ TIANamp Blood DNA. ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນດັ່ງຕໍ່ໄປນີ້. ຜົນໄດ້ຮັບແມ່ນໄດ້ລະບຸໄວ້ເປັນການອ້າງອີງເທົ່ານັ້ນ, ຜົນການສະກັດເອົາຕົວຈິງແມ່ນຂື້ນກັບເງື່ອນໄຂຂອງຕົວຢ່າງ.

ການສະກັດເອົາ DNA ຂອງກ້າມເລືອດສາມາດ ດຳ ເນີນໄດ້ດ້ວຍການໃຊ້ນໍ້າຢາທີ່ສະ ໜອງ ໃຫ້ໃນສອງຊຸດນີ້ໂດຍພຽງແຕ່ປ່ຽນໂປຣໂຕຄໍເປັນຄໍາແນະນໍາສະເພາະສໍາລັບການສະກັດເອົາເມັດເລືອດ DNA. ສຳ ເນົາອ່ອນຂອງພິທີການສະກັດເອົາເມັດເລືອດ DNA ສາມາດອອກໃຫ້ຕາມການຮ້ອງຂໍ.

ລະງັບຕົວຢ່າງສົດ with ດ້ວຍ PBS 1 ມລ, ນໍ້າເຄັມປົກກະຕິຫຼືບັຟເຟີ TE. ເຮັດໃຫ້ຕົວຢ່າງເປັນເອກະພາບຢ່າງສົມບູນໂດຍເຄື່ອງເຮັດເປັນ homogenizer ແລະເກັບເອົານ້ ຳ toົນຕົກລົງໄປທາງລຸ່ມຂອງທໍ່ໂດຍການເຮັດເປັນສູນກາງ. ຖິ້ມ supernatant, ແລະ resuspend ການຕົກຕະກອນທີ່ມີ 200 μl buffer GA. ການກັ່ນຕອງ DNA ຕໍ່ໄປນີ້ສາມາດດໍາເນີນການໄດ້ຕາມຄໍາແນະນໍາ.

ສໍາລັບການກັ່ນຕອງ gDNA ໃນ plasma, ຕົວຢ່າງ serum ແລະນໍ້າໃນຮ່າງກາຍ, ແນະນໍາໃຫ້ໃຊ້ຊຸດ TIANamp Micro DNA. ສໍາລັບການຊໍາລະເຊື້ອໄວຣັສ gDNA ຈາກຕົວຢ່າງ serum/plasma, TIANamp Virus DNA/RNA Kit ຖືກແນະນໍາ. ສໍາລັບການກັ່ນຕອງ gDNA ຂອງເຊື້ອແບັກທີເຣັຍຈາກຕົວຢ່າງ serum ແລະ plasma, TIANamp Bacteria DNA Kit ໄດ້ຖືກແນະນໍາ (lysozyme ຄວນຖືກລວມເຂົ້າກັບເຊື້ອແບັກທີເຣຍໃນທາງບວກ). ສໍາລັບຕົວຢ່າງນໍ້າລາຍ, ໄດ້ແນະນໍາໃຫ້ມີຊຸດ Hi-Swab DNA Kit ແລະ TIANamp Bacteria DNA Kit.

ຊຸດພືດ DNA ທີ່ປອດໄພຫຼືລະບົບພືດ DNAquick ໄດ້ຖືກແນະ ນຳ ໃຫ້ໃຊ້ ສຳ ລັບການສະກັດ ກຳ ມະພັນຂອງເຊື້ອລາ. ສໍາລັບການສະກັດເອົາກໍາມະພັນຂອງເຊື້ອລາ, ໄດ້ແນະນໍາໃຫ້ຊຸດ TIANamp Yeast DNA Kit (lyticase ຄວນກຽມດ້ວຍຕົນເອງ).