2 × Taq PCR ປະສົມ

Taq DNA polymerase ທີ່ບໍລິສຸດແລະມີປະສິດທິພາບສູງສຸດ.

Taq DNA Polymerase ແມ່ນໂປຣຕີນທີ່ສົມທົບກັບນ້ ຳ ໜັກ ໂມເລກຸນ 94 kDa, ເຊິ່ງໄດ້ຖືກຊັກຈູງແລະສະແດງອອກມາຈາກ Escherichia coli cloned ດ້ວຍ Thermo aquatica DNA Polymerase gene, ແລະຈາກນັ້ນຖືກກັ່ນຕອງແລະແຍກອອກໂດຍສາມຂັ້ນຕອນການກັ່ນຕອງຖັນ. ເອນໄຊມີສະຖຽນລະພາບທີ່ດີແລະມີຄວາມສະເພາະເຈາະຈົງ, ບໍ່ມີມົນລະພິດທາງດ້ານ nuclease ແລະເຊື້ອແບັກທີເຣັຍ DNA, ແລະເsuitableາະສົມກັບການຂະຫຍາຍ PCR ປົກກະຕິ.

ໜຶ່ງ ທໍ່ Taq MasterMix (ການຢັ້ງຢືນຜະລິດຕະພັນເຕັກໂນໂລຍີສູງລະດັບຊາດ)

Ta Taq MasterMix ໄດ້ປັບປຸງຄວາມສະເພາະເຈາະຈົງແລະຄວາມອ່ອນໄຫວຂອງປະຕິກິລິຍາ PCR ແລະສາມາດຂະຫຍາຍແມ່ແບບທີ່ຊັບຊ້ອນດ້ວຍເນື້ອໃນ GC ສູງ, ໂຄງສ້າງຂັ້ນສອງແລະຄ້າຍຄືກັນ. ຕ່ ຳ ສຸດ 2 ສະບັບຂອງແມ່ແບບເປົ້າcanາຍສາມາດຂະຫຍາຍອອກໄດ້, ຮັບປະກັນຜົນການທົດລອງທີ່ຖືກຕ້ອງຫຼາຍຂຶ້ນ.

formula ສູດ Taq MasterMix ທີ່ເປັນເອກະລັກເຮັດໃຫ້ລະບົບປະຕິກິລິຍາທັງstableົດມີຄວາມstableັ້ນຄົງຫຼາຍ, ແລະກິດຈະ ກຳ ຈະບໍ່ໄດ້ຮັບຜົນກະທົບຈາກການແຊ່ແຂງລະລາຍຫຼືການເກັບຮັກສາໄວ້ດົນນານຢູ່ທີ່ 4 ° C.

solution ວິທີແກ້ໄຂປະສົມ PCR ທີ່ກຽມໄວ້ລ່ວງ ໜ້າ ທີ່ມີປະສິດທິພາບແລະມີປະສິດທິພາບສາມາດເຮັດໃຫ້ການດໍາເນີນງານໄວແລະລຽບງ່າຍ, ຫຼຸດຜ່ອນຄວາມແຮງຂອງແຮງງານແລະຄວາມຜິດພາດໃນການເກັບຕົວຢ່າງ. ເຄື່ອງເພີ່ມປະສິດທິພາບແລະປະສິດທິພາບ PCR ທີ່ມີປະສິດທິພາບສູງແມ່ນລວມຢູ່ໃນເຄື່ອງປະສົມເຊັ່ນກັນ, ເຊິ່ງຫຼຸດຜ່ອນຄວາມຕ້ອງການໃນເງື່ອນໄຂ PCR.

product ຜະລິດຕະພັນນີ້ມີທັງລະບົບປະກອບດ້ວຍສານສີແລະບໍ່ມີສີຍ້ອມ. ຜະລິດຕະພັນ MasterMix ທີ່ມີສີຍ້ອມຜ້າສາມາດຖືກໄຟຟ້າໂດຍກົງຫຼັງຈາກ PCR, ໂດຍບໍ່ມີການໂຫຼດໂຫຼດ.

ແມວ. ບໍ່ ຂະ ໜາດ ບັນຈຸ
4992229 1 ມລ
4992230 5*1 ມລ
4992255 1 ມລ
4992256 5 × 1 ມລ

ລາຍລະອຽດຜະລິດຕະພັນ

ຕົວຢ່າງການທົດລອງ

ຄຳ ຖາມທີ່ຖືກຖາມເລື້ອຍ

ປ້າຍຜະລິດຕະພັນ

ຄໍານິຍາມກິດຈະກໍາ

ກິດຈະກໍາຂອງ 1 ໜ່ວຍ (U) Taq DNA Polymerase ຖືກກໍານົດເປັນຈໍານວນຂອງ enzyme ທີ່ຕ້ອງການເພື່ອລວມເອົາ 10 nmol deoxynucleotides ເຂົ້າໄປໃນສານທີ່ບໍ່ສາມາດລະລາຍໃນກົດໄດ້ທີ່ 74 ℃ພາຍໃນ 30 ນາທີໂດຍນໍາໃຊ້ DNA ເຊື້ອອະສຸຈິ salmon ທີ່ເປີດໃຊ້ເປັນແມ່ແບບ/primer.

ການຄວບຄຸມຄຸນະພາບ

ຄວາມບໍລິສຸດໂດຍການກວດຫາ SDS-PAGE ແມ່ນຫຼາຍກວ່າ 99%; ບໍ່ພົບກິດຈະກໍາຂອງ nuclease exogenous; ພັນທຸກໍາສໍາເນົາອັນດຽວຢູ່ໃນກໍາມະພັນຂອງມະນຸດສາມາດຂະຫຍາຍໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ; ບໍ່ມີການປ່ຽນແປງກິດຈະກໍາທີ່ສໍາຄັນເມື່ອເກັບຮັກສາໄວ້ໃນອຸນຫະພູມຫ້ອງເປັນເວລານຶ່ງອາທິດ.

ພາລາມິເຕີເຕັກນິກຫຼັກ

ເອນໄຊມີກິດຈະກໍາ polymerase 5′-3 and ແລະກິດຈະກໍາ exonuclease 5′-3,, ແລະໂດຍບໍ່ມີກິດຈະກໍາ exonuclease 3′-5. ຄວາມໄວຂະຫຍາຍຂອງ DNA polymerization ແມ່ນ 1-2 kb/min ທີ່ 70-75. ຜະລິດຕະພັນ PCR ມີການທັບຊ້ອນ 3′-dA, ເຊິ່ງສາມາດຖືກໂຄນໂດຍກົງໃນ vector TA-cloning.

ຄໍາຮ້ອງສະຫມັກ

ໂດຍທົ່ວໄປມັນຖືກໃຊ້ສໍາລັບການຂະຫຍາຍ, ການຂະຫຍາຍເບື້ອງຕົ້ນ, ການຈັດລໍາດັບ, ແລະ A-tailing ຢູ່ປາຍສຸດຂອງ DNA ທີ່ຕ່ ຳ ກວ່າ <6 kb ແລະມີຄວາມຕ້ອງການຄວາມຊື່ສັດຕໍ່າ.

ຜະລິດຕະພັນທັງຫມົດສາມາດໄດ້ຮັບການປັບແຕ່ງສໍາລັບ ODM/OEM. ສໍາລັບລາຍລະອຽດ,ກະລຸນາຄລິກບໍລິການລູກຄ້າ (ODM/OEM)


  • ທີ່ຜ່ານມາ:
  • ຕໍ່ໄປ:

  • product_certificate04 product_certificate01 product_certificate03 product_certificate02
    ×
    Experimental Example ໃຊ້ DNA ພັນທຸ ກຳ ຂອງມະນຸດເປັນແມ່ແບບເພື່ອຂະຫຍາຍຊິ້ນສ່ວນ 1 kb
    Experimental Example ຫຼັງຈາກປະຕິກິລິຍາ PCR, ເອົາ 5 μlສໍາລັບການກວດຫາ electrophoresis.
    ຖາມ: ບໍ່ມີແຖບຂະຫຍາຍສຽງ

    ແມ່ແບບ A-1

    template ແມ່ແບບປະກອບດ້ວຍສິ່ງປົນເປື້ອນທາດໂປຼຕີນຫຼືຕົວຍັບຍັ້ງ Taq, ແລະອື່ນ — —— ເຮັດຄວາມສະອາດແມ່ແບບ DNA, ກຳ ຈັດສິ່ງເປິເປື້ອນຂອງໂປຣຕີນຫຼືສະກັດເອົາແມ່ແບບ DNA ອອກພ້ອມກັບຊຸດເຄື່ອງກັ່ນຕອງ.

    ■ການປະຕິເສດແມ່ແບບບໍ່ສົມບູນແບບ - ເພີ່ມອຸນຫະພູມທີ່ມີຄວາມບໍ່ສົມດຸນຢ່າງເiatelyາະສົມແລະຍືດເວລາຂອງການເຮັດໃຫ້ມີການຄໍ້າປະກັນໄດ້ຢ່າງເາະສົມ.

    rad ການເສື່ອມສະພາບຂອງແມ່ແບບ —— ກະກຽມແມ່ແບບຄືນໃ່.

    A-2 Primer

    quality ຄຸນນະພາບທີ່ບໍ່ດີຂອງ primers —— ສັງເຄາະສີ primer ຄືນໃ່.

    rad ການເສື່ອມປະສິດທິພາບຂອງ primer —— ລວບລວມເອົາ primers ທີ່ມີຄວາມເຂັ້ມສູງໃສ່ໃນປະລິມານ ໜ້ອຍ ເພື່ອຮັກສາ. ຫຼີກເວັ້ນການແຊ່ແຂງຫຼາຍ tha ແລະການລະລາຍຫຼືການເກັບຮັກສາໄວ້ໃນໄລຍະຍາວ 4 ° C.

    design ການອອກແບບ primers ບໍ່ເperາະສົມ (ຕົວຢ່າງຄວາມຍາວຂອງ primer ບໍ່ພຽງພໍ, dimer ສ້າງຂຶ້ນລະຫວ່າງ primers, ແລະອື່ນ)) -ການອອກແບບ primers ຄືນໃavoid່ (ຫຼີກເວັ້ນການສ້າງ primer dimer ແລະໂຄງສ້າງຂັ້ນສອງ).

    A-3 ມກ2+ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ

    g ມກ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕໍ່າເກີນໄປ - ເພີ່ມປະລິມານ mg ຢ່າງເາະສົມ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ: ເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງ Mg2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນໂດຍຊຸດປະຕິກິລິຍາຈາກ 1 mM ຫາ 3 mM ໂດຍມີໄລຍະຫ່າງ 0.5 mM ເພື່ອກໍານົດ Mg ທີ່ດີທີ່ສຸດ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງແຕ່ລະແມ່ແບບແລະ primer.

    A-4 ອຸນຫະພູມອ່ອນເພຍ

    temperature ອຸນຫະພູມໃນການຫລອມສູງສົ່ງຜົນກະທົບຕໍ່ການຜູກມັດຮອງພື້ນແລະແມ່ແບບ. —— ຫຼຸດອຸນຫະພູມໃນການຫຼອມແລະປັບສະພາບໃຫ້ດີທີ່ສຸດດ້ວຍການໄລ່ສີ 2 ອົງສາ.

    A-5 ເວລາຂະຫຍາຍ

    time ເວລາຂະຫຍາຍສັ້ນ - ເພີ່ມເວລາການຂະຫຍາຍ.

    ຖາມ: ໃນທາງບວກທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ

    ປະກົດການ: ຕົວຢ່າງເຊີງລົບຍັງສະແດງໃຫ້ເຫັນແຖບ ລຳ ດັບເປົ້າາຍ.

    A-1 ການປົນເປື້ອນຂອງ PCR

    ■ຂ້າມການປົນເປື້ອນຂອງລໍາດັບເປົ້າorາຍຫຼືຜະລິດຕະພັນການຂະຫຍາຍ - ລະມັດລະວັງບໍ່ໃຫ້ທໍ່ສົ່ງນໍ້າທີ່ມີລໍາດັບເປົ້າinາຍຢູ່ໃນຕົວຢ່າງທາງລົບຫຼືເຮັດໃຫ້ມັນໄຫຼອອກຈາກທໍ່ centrifuge. ນ້ ຳ ຢາຫຼືອຸປະກອນຄວນໄດ້ຮັບການອັດຕະໂນມັດເພື່ອ ກຳ ຈັດກົດນິວເຄຼຍທີ່ມີຢູ່, ແລະການມີການປົນເປື້ອນຄວນຖືກ ກຳ ນົດຜ່ານການທົດລອງຄວບຄຸມທາງລົບ.

    ination ການປົນເປື້ອນສານ Reagent —— ວາງນໍ້າຢາແລະເກັບຮັກສາໄວ້ໃນອຸນຫະພູມຕໍ່າ.

    A-2 Primer

    g ມກ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນຕໍ່າເກີນໄປ - ເພີ່ມປະລິມານ mg ຢ່າງເາະສົມ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ: ເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງ Mg2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນໂດຍຊຸດປະຕິກິລິຍາຈາກ 1 mM ຫາ 3 mM ໂດຍມີໄລຍະຫ່າງ 0.5 mM ເພື່ອກໍານົດ Mg ທີ່ດີທີ່ສຸດ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງແຕ່ລະແມ່ແບບແລະ primer.

    design ການອອກແບບ primer ທີ່ບໍ່ຖືກຕ້ອງ, ແລະລໍາດັບເປົ້າhasາຍມີຄວາມຄ້າຍຄືກັນກັບລໍາດັບທີ່ບໍ່ແມ່ນເປົ້າາຍ. --- ການອອກແບບຄືນໃ່.

    ຖາມ: ການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ແມ່ນສະເພາະ

    ປະກົດການ: ວົງຂະຫຍາຍສຽງ PCR ແມ່ນບໍ່ສອດຄ່ອງກັບຂະ ໜາດ ທີ່ຄາດໄວ້, ທັງໃຫຍ່ຫຼືນ້ອຍ, ຫຼືບາງຄັ້ງທັງສອງແຖບຂະຫຍາຍສຽງສະເພາະແລະວົງດົນຕີການຂະຫຍາຍທີ່ບໍ່ສະເພາະເກີດຂຶ້ນ.

    A-1 Primer

    ■ຄວາມສະເພາະຂອງ primer ບໍ່ດີ

    —— primer ອອກແບບໃ່.

    concentration ຄວາມເຂັ້ມຂອງ primer ສູງເກີນໄປ —— ເພີ່ມອຸນຫະພູມ denaturation ຢ່າງຖືກຕ້ອງແລະຍືດເວລາການເຮັດໃຫ້ເປັນ denaturation ໄດ້ດົນ.

    A-2 Mg2+ ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ

    ■ The Mg2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງເກີນໄປ —— ຫຼຸດຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ Mg2+ ຢ່າງເາະສົມ: ເພີ່ມປະລິມານ Mg ໃຫ້ເາະສົມ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນໂດຍຊຸດປະຕິກິລິຍາຈາກ 1 mM ຫາ 3 mM ໂດຍມີໄລຍະຫ່າງ 0.5 mM ເພື່ອກໍານົດ Mg ທີ່ດີທີ່ສຸດ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງແຕ່ລະແມ່ແບບແລະ primer.

    A-3 Polymerase ຄວາມຮ້ອນທີ່ສຸດ

    amount ປະລິມານເອນໄຊຫຼາຍເກີນໄປ - ຫຼຸດປະລິມານເອນໄຊລົງໄດ້ຢ່າງເatາະສົມໃນລະຫວ່າງ 0.5 U.

    A-4 ອຸນຫະພູມອ່ອນເພຍ

    temperature ອຸນຫະພູມໃນການຫຼໍ່ຫຼອມຕ່ ຳ ເກີນໄປ-ເພີ່ມອຸນຫະພູມໃນການຫຼໍ່ທີ່ເorາະສົມຫຼື ນຳ ໃຊ້ວິທີການຫຼອມທັງສອງຂັ້ນຕອນ.

    ຮອບວຽນ A-5 PCR

    cles ຮອບ PCR ຫຼາຍເກີນໄປ - ຫຼຸດຈໍານວນຂອງຮອບ PCR ລົງ.

    ຖາມ: ແຜ່ນທີ່ມີຮອຍແຕກຫຼືເປື່ອຍ

    A-1 Primer—— ຄວາມສະເພາະທີ່ບໍ່ດີ —— ອອກແບບ primer ໃ,່, ປ່ຽນຕໍາ ແໜ່ງ ແລະຄວາມຍາວຂອງ primer ເພື່ອເພີ່ມຄວາມສະເພາະຂອງມັນ; ຫຼືປະຕິບັດ PCR ທີ່ຕິດຢູ່.

    ແມ່ແບບ A-2 DNA

    —— ແມ່ແບບບໍ່ບໍລິສຸດ —— ເຮັດຄວາມສະອາດແມ່ແບບຫຼືສະກັດ DNA ດ້ວຍຊຸດເຄື່ອງເຮັດຄວາມສະອາດ.

    A-3 ມກ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນ

    —— mg2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນສູງເກີນໄປ - ຫຼຸດຜ່ອນ Mg ຢ່າງຖືກຕ້ອງ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນ: ເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງ Mg2+ ຄວາມເຂັ້ມຂຸ້ນໂດຍຊຸດປະຕິກິລິຍາຈາກ 1 mM ຫາ 3 mM ໂດຍມີໄລຍະຫ່າງ 0.5 mM ເພື່ອກໍານົດ Mg ທີ່ດີທີ່ສຸດ2+ ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງແຕ່ລະແມ່ແບບແລະ primer.

    A-4 dNTP

    —— ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ dNTPs ສູງເກີນໄປ —— ຫຼຸດຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ dNTP ຢ່າງເາະສົມ

    A-5 ອຸນຫະພູມອ່ອນເພຍ

    —— ອຸນຫະພູມໃນການຫຼໍ່ຫຼອມຕໍ່າເກີນໄປ —— ເພີ່ມອຸນຫະພູມໃນການຫຼໍ່ທີ່ເroາະສົມ

    A-6 ຮອບວຽນ

    —— ຫຼາຍຮອບເກີນໄປ —— ເພີ່ມປະສິດທິພາບ ຈຳ ນວນຮອບວຽນ

    ຖາມ: ຄວນເພີ່ມ DNA ແມ່ແບບຫຼາຍປານໃດໃນລະບົບປະຕິກິລິຍາ PCR 50 μl?
    ytry
    ຖາມ: ເຮັດແນວໃດເພື່ອຂະຫຍາຍຊິ້ນສ່ວນຍາວ?

    ຂັ້ນຕອນທໍາອິດແມ່ນເລືອກ polymerase ທີ່ເາະສົມ. ປົກກະຕິ Taq polymerase ບໍ່ສາມາດກວດຄືນໄດ້ເນື່ອງຈາກຂາດກິດຈະກໍາ exonuclease 3'-5 ', ແລະຄວາມບໍ່ເຂົ້າກັນຈະຊ່ວຍຫຼຸດປະສິດທິພາບການຂະຫຍາຍຂອງຊິ້ນສ່ວນໄດ້ຢ່າງຫຼວງຫຼາຍ. ເພາະສະນັ້ນ, Taq polymerase ປົກກະຕິບໍ່ສາມາດຂະຫຍາຍຊິ້ນສ່ວນເປົ້າlargerາຍໃຫຍ່ກວ່າ 5 kb ໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ. Taq polymerase ທີ່ມີການດັດແປງພິເສດຫຼື polymerase ຄວາມຊື່ສັດສູງອື່ນ other ຄວນຖືກເລືອກເພື່ອປັບປຸງປະສິດທິພາບການຂະຫຍາຍແລະຕອບສະ ໜອງ ກັບຄວາມຕ້ອງການຂອງການຂະຫຍາຍຊິ້ນສ່ວນທີ່ຍາວນານ. ນອກຈາກນັ້ນ, ການຂະຫຍາຍຊິ້ນສ່ວນທີ່ຍາວອອກຍັງຮຽກຮ້ອງໃຫ້ມີການປັບປ່ຽນການອອກແບບເບື້ອງຕົ້ນທີ່ເ,າະສົມ, ເວລາທີ່ບໍ່ມີຕົວຕົນ, ເວລາຂະຫຍາຍ, pH ຂອງກັນຊົນ, ແລະອື່ນ Usually. ເພື່ອປ້ອງກັນຄວາມເສຍຫາຍຂອງແມ່ແບບ, ເວລາ denaturation ຢູ່ທີ່ 94 ° C ຄວນຈະຫຼຸດລົງເປັນ 30 ວິນາທີຫຼື ໜ້ອຍ ກ່ວາຕໍ່ຮອບ, ແລະເວລາທີ່ຈະເພີ່ມອຸນຫະພູມເປັນ 94 ° C ກ່ອນການຂະຫຍາຍຄວນ ໜ້ອຍ ກວ່າ 1 ນາທີ. ຍິ່ງໄປກວ່ານັ້ນ, ການຕັ້ງອຸນຫະພູມຂະຫຍາຍຢູ່ທີ່ປະມານ 68 ° C ແລະການອອກແບບເວລາຂະຫຍາຍຕາມອັດຕາ 1 kb/min ສາມາດຮັບປະກັນການຂະຫຍາຍຊິ້ນສ່ວນທີ່ຍາວອອກໄດ້ຢ່າງມີປະສິດທິພາບ.

    ຖາມ: ເຮັດແນວໃດເພື່ອປັບປຸງຄວາມສັດຊື່ຕໍ່ການຂະຫຍາຍຂອງ PCR?

    ອັດຕາຄວາມຜິດພາດຂອງການຂະຫຍາຍ PCR ສາມາດຫຼຸດລົງໄດ້ໂດຍການໃຊ້ DNA polymerases ຕ່າງ with ດ້ວຍຄວາມຊື່ສັດສູງ. ໃນບັນດາໂປຼຕີນທັງTaົດຂອງ Taq DNA ທີ່ພົບມາຮອດປະຈຸບັນ, ເອນໄຊ Pfu ມີອັດຕາຄວາມຜິດພາດຕໍ່າສຸດແລະຄວາມຊື່ສັດສູງສຸດ (ເບິ່ງຕາຕະລາງຄັດຕິດ). ນອກ ເໜືອ ໄປຈາກການຄັດເລືອກເອນໄຊ, ນັກຄົ້ນຄວ້າຍັງສາມາດຫຼຸດອັດຕາການກາຍພັນຂອງ PCR ຕື່ມອີກໂດຍການປັບປຸງເງື່ອນໄຂປະຕິກິລິຍາໃຫ້ດີທີ່ສຸດ, ລວມທັງການເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງສ່ວນປະກອບຂອງສານກັນບູດ, ຄວາມເຂັ້ມຂົ້ນຂອງ polymerase ທີ່ມີຄວາມຮ້ອນທີ່ສຸດແລະການເພີ່ມປະສິດທິພາບຂອງcycleາຍເລກຮອບວຽນ PCR.

    ຂຽນຂໍ້ຄວາມຂອງເຈົ້າຢູ່ທີ່ນີ້ແລະສົ່ງໃຫ້ພວກເຮົາ